摘要： 为探寻一种操作简单、经济实用，且能获得纯度高、活性强的肉鸡长骨成骨细胞 （Osteoblast，OB）体外培养方法，试验将1日龄AA肉鸡胫骨皮质骨剪碎（1~3 mm2 ）后，移入60 mm 细胞培养皿中，加入15% FBS的DMEM完全培养液，于37 ℃培养7 d后，进行传代。倒置显微镜观 察成骨细胞形态；CCK-8法检测成骨细胞增殖活性；碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP）、 Ⅰ型胶原免疫荧光及茜素红S（Alizarin red s，ARS）染色鉴定成骨细胞体外生物学特性；实时定量 PCR 法检测成骨细胞标志基因 ALP、Runt 相关转录因子（Runt-related transcription factor 2， Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（Osterix，OSX）及Ⅰ型胶原蛋白α1链（Collagen type 1 alpha 1 chain，COL1A1）表达。结果显示：分离获得的细胞具有典型成骨细胞形态特征，增殖活性强，纯 度高（97.4%），大量分泌ALP和Ⅰ型胶原，高表达ALP、Runx2、OSX和COL1A1，且茜素红S染色呈 阳性。研究表明组织块法获得的成骨细胞纯度高、活性好，且成骨能力强。

关键词: 鸡；胫骨成骨细胞；组织块法；分离与培养

中图分类号: 

• S831.2