中国家禽 ›› 2026, Vol. 48 ›› Issue (10): 95-101.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2026.10.011

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鸽A群轮状病毒TaqMan RT-qPCR检测方法的建立及应用

陈晓东,孙成龙,孙文鑫,张 杨,邹 健,王凤雪,温永俊*   

  1. (内蒙古农业大学兽医学院,农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特 010018)
  • 出版日期:2026-10-15 发布日期:2026-10-10
  • 作者简介:温永俊(1979-),男,博士,教授,主要从事动物传染病的诊断与预防和新型疫苗创制研究,E-mail:yongjunwen@126.com

  • Online:2026-10-15 Published:2026-10-10

摘要: 试验旨在建立检测鸽A群轮状病毒的TaqMan RT-qPCR方法。试验通过比对NCBI数据库中收录的鸽源A群轮状病毒VP6基因序列,筛选出104 bp保守区域,针对其设计特异性TaqMan探针,并进行敏感性、特异性、重复性试验,通过检测临床样品比较与常规PCR检测结果的符合率。结果显示:当引物浓度和探针浓度分别为0.5 μmol/L和0.4 μmol/L,退火温度为58 ℃时,建立的TaqMan RT-qPCR扩增效果较好,检出限为1×100 copies/μL,较常规PCR方法高1 000倍;该方法特异性良好,与其他常见鸽源病毒(鸽疱疹病毒、鸽腺病毒、鸽圆环病毒、新城疫病毒)无交叉反应,重复性高,组内、组间变异系数均小于1%,应用该方法对98份临床样品的检测结果与常规PCR检测结果符合率为87.8%。研究表明,试验建立的TaqMan RT-qPCR为鸽A群轮状病毒的检测提供了快速且灵敏的方法,为其流行病学调查、早期预警和有效防控提供了重要的技术支持。

关键词: 鸽轮状病毒;VP6蛋白;TaqMan RT-qPCR;流行病学

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