摘要： 为系统解析鸡源胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）蛋白的结构特征、表达调控 及其在精原干细胞（SSC）生态位中的潜在功能，研究通过生物信息学手段对鸡GDNF蛋白进行 结构域预测和系统进化分析，明确其 N端信号肽特征及胞外定位属性。构建 GDNF过表达质 粒并转染鸡睾丸支持细胞，采用qPCR、WB与ELISA检测其mRNA和蛋白表达水平，分析其分 泌动态，免疫荧光技术观察其细胞内定位，同时比较含血清与无血清培养条件下的GDNF分泌 差异。结果显示，鸡GDNF蛋白具备典型的信号肽，定位于胞外基质，缺乏跨膜结构域，属于典 型分泌型蛋白。在支持细胞中过表达后，GDNF的mRNA与蛋白表达水平均显著升高，分泌呈 时间依赖性动态变化，免疫荧光检测显示其主要分布于细胞膜周围。研究结果表明，鸡GDNF 蛋白具备分泌型结构特征，能稳定表达并分泌至胞外，为进一步研究鸡GDNF相关功能提供了 基础。
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