摘要： 研究旨在对鸡APOC3蛋白进行生物信息学分析及构建APOC3基因组织表达谱， 并探究其对肌内前体脂肪细胞分化的影响。试验从 NCBI（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/）数据 库下载 APOC3 蛋白氨基酸序列并进行生物信息学分析；利用 PCR 技术扩增 APOC3 基因 CDS 序列，采用同源重组方法构建 APOC3 基因过表达载体；利用 qPCR 检测 APOC3 基因在鸡不同 组织中的表达量，分析 APOC3基因表达规律；利用差速贴壁法分离 14日龄 AA 肉鸡胸肌原代 肌内前脂肪细胞；在肌内前脂肪细胞中过表达APOC3基因，利用qPCR、检测甘油三酯（Triglyc? eride，TG）含量、油红O染色评估APOC3基因对肌内前体脂肪细胞分化成脂的影响。生物信息 学分析结果显示，同源基因 APOC3 在鸡与火鸡之间序列保守度较高，与小鼠保守度最低； APOC3蛋白是定位于细胞外、无跨膜结构域的分泌型蛋白。组织表达分析结果显示，APOC3基 因在肝脏中特异性表达。体外试验结果分析显示，与对照组相比，试验组 APOC3 mRNA 表达 水平升高了60倍，甘油三酯含量显著增加（P<0.05），细胞内脂滴含量极显著增多（P<0.01），脂 肪细胞分化相关标志基因过氧化物增殖物激活受体γ（Peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ）、脂肪酸结合蛋白 4（Fatty acid binding protein 4，FABP4）、脂肪酸结合蛋白 5 （Fatty acid binding protein 5，FABP5）、CCAAT/增强子结合蛋白 α（CCAAT/enhancer binding protein alpha，C/EBPα）、脂蛋白脂肪酶（Lipoprotein lipase，LPL）mRNA 的表达水平显著上升 （P<0.05）；APOC3 蛋白与载脂蛋白 A1（APOA1）、异质核核糖核蛋白 A/B（HNRNPAB）、高温需 求因子A3（HTRA3）、肿瘤坏死因子受体超家族成员6B（TNFRSF6B）、载脂蛋白D（APOD）存在 相互作用。研究表明，鸡 APOC3蛋白属于分泌型蛋白，其编码基因在肝脏中特异性表达且与 火鸡之间保守序列相似度较高；鸡APOC3基因过表达能够促进鸡肌内前体脂肪细胞分化与脂 质积累。

关键词: 鸡；APOC3基因；肌内脂肪；生物信息学分析

中图分类号: 

• S831.2