中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (9): 121-127.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.09.016

• 预防兽医 • 上一篇    下一篇

B型禽偏肺病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及应用

沈海强1,车艳杰2,宋新宇2,高 冉2,付旭彬2*,金天明1*   

  1. (1.天津农学院动物科学与动物医学学院, 天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室,天津 300392; 2.天津瑞普生物技术股份有限公司,天津 300308)
  • 出版日期:2024-09-15 发布日期:2024-09-19
  • 作者简介:沈海强(1999-),男,硕士研究生,研究方向为预防兽医,E-mail:1263726802@qq.com

  • Online:2024-09-15 Published:2024-09-19

摘要: 试验旨在开发一种特异性检测 B 亚型禽偏肺病毒(aMPV-B)的方法。研究参照 GenBank中的aMPV-G基因序列设计一对特异性引物,建立aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方 法,优化该方法的反应条件,建立标准曲线,进行特异性、重复性和敏感性试验,并将该方法用于 临床样品的检测。结果显示:建立的TaqMan荧光定量PCR方法只能检测出B亚型aMPV,其敏感 性能达到1.34×101 copies/μL,斜率为-3.346,截距为40.01,相关系数(R2 )为1.00,循环阈值(Ct)与 模板拷贝数之间呈现良好的相关性;临床样品检测结果显示,该方法检测出18份样品阳性,而普 通PCR仅检测出10份阳性。综上所述,建立的aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法在样品检测 中表现出良好的特异性和较高的敏感性,适用于临床样品的aMPV-B检测。

关键词: B型禽偏肺病毒;G基因;实时荧光定量PCR;TapMan荧光探针

中图分类号: