摘要: 研究旨在制备一种针对QX型传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV) 的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗并对其免疫保护效果进行初步评价。试验首先构 建了分别表达 QX 型 IBV S 蛋白(QXLS)、M 蛋白(QXLM)和 E 蛋白(QXLE)的三种重组杆状病 毒 rBacmid-QXLS、rBacmid-QXLM 和 rBacmid-QXLE,并通过间接免疫荧光试验(IFA)和 West? ern blot鉴定目的蛋白的表达;进一步将 3种重组杆状病毒通过适当比例共感染 Sf9细胞获得 VLP,经蔗糖密度梯度离心纯化后使用透射电子显微镜观察鉴定VLP的组装效果;最后将纯化 的VLP与氢氧化铝佐剂混合制成疫苗免疫SPF鸡进行免疫保护效果评价。结果显示:S、M和 E三种目的蛋白均能成功表达,透射电子显微镜观察可见组装形成的VLP呈现典型的椭圆形 病毒样结构,直径为80~120 nm;单独VLP疫苗免疫具有一定的免疫保护效果,QXL87+VLP疫 苗联合免疫保护效果较好,可有效减轻临床病变、降低气管和泄殖腔排毒量及组织器官载毒 量。研究表明,试验已经成功制备出QX型IBV VLP,且具有良好的免疫原性,为后续进一步研 制基于VLP技术的QX型IBV基因工程疫苗奠定了基础。
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