摘要: 为探讨褪黑素对蛋鸡卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的保护作用,试验选取产蛋高峰期 蛋鸡进行颗粒细胞分离培养,分别用0、12.5、25、50、100、200 μmol/L H2O2处理3、6、9 h,根据颗粒 细胞增殖活性和氧化指标变化建立氧化应激模型。试验分为4组:试验Ⅰ组为对照组,试验Ⅱ组 为H2O2组,试验Ⅲ组为H2O2+Mel组,试验Ⅳ组为褪黑素组,利用CCK-8法、DCF法及TUNEL法分 别检测各组细胞增殖率、活性氧(ROS)水平和凋亡率,q-PCR 和 Western blot 检测抗氧化指标 SOD1、SOD2、CAT、GPX3和PRDX3基因和蛋白的表达水平。结果显示:①与对照组相比,H2O2组细 胞增殖率降低(P<0.05),丙二醛(MDA)水平增加(P<0.05),过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD)活性下降(P<0.05);②与对照组相比,H2O2组细胞活性氧(ROS)水平、凋亡率增加(P<0.05), 增殖活性降低(P<0.05),Ⅲ组细胞活性氧水平、凋亡率降低(P<0.05),增殖活性增加(P<0.05); ③与对照组相比,H2O2组细胞SOD1、SOD2、CAT、GPX3和PRDX3等抗氧化基因和蛋白表达下降 (P<0.05),而褪黑素干预后则促进了抗氧化基因和蛋白表达(P<0.05)。研究提示:褪黑素干预后 缓解了H2O2对颗粒细胞的氧化应激损伤,其可通过清除活性氧及上调蛋鸡卵巢颗粒细胞抗氧化 基因和蛋白的表达起保护作用。
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