中国家禽 ›› 2024, Vol. 46 ›› Issue (9): 175-181.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2024.09.024

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Trizol法提取鸡肝组织总RNA及miRNA的条件优化研究

陈紫薇,张吉龙,庄武超,郑晓彤,陈建飞*   

  1. (江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江 212100)
  • 出版日期:2024-09-15 发布日期:2024-09-19
  • 作者简介:陈紫薇(1999-),女,硕士研究生,研究方向为动物遗传育种,E-mail:czw20222022@163.com

  • Online:2024-09-15 Published:2024-09-19

摘要: 试验旨在优化总 RNA 及 miRNA 的 Trizol 法提取条件。试验利用 Trizol 法提取鸡 肝脏组织总RNA,在RNA的沉降阶段,将样品置于室温、4 ℃、-20 ℃和-80 ℃条件下分别放置 10 min、30 min 和60 min,另外将样品在-80 ℃条件下放置 3 h、6 h、12 h,分别探究不同沉降温 度和不同沉降时间对总 RNA 完整度、纯度、质量浓度以及 miRNA 提取量的影响。结果显示: 不同沉降温度和不同沉降时间均不影响总RNA的完整性;沉降时间能显著降低RNA的A260/A280 比值(P<0.05),但仍在 1.90~1.95范围内;不同沉降温度和不同沉降时间均显著影响总 RNA和 miRNA的提取量(P<0.05)。研究表明,-20 ℃放置30 min是总RNA提取的适宜条件,-80 ℃放 置3 h为miRNA提取的适宜条件,-80 ℃放置10 min、4 ℃放置30 min和-20 ℃放置60 min的miR? NA提取效果良好,适合短时间提取miRNA的相关研究。

关键词: 鸡;肝组织;总RNA;miRNA;Trizol法;RNA纯度;RNA浓度

中图分类号: