摘要： 研究旨在制备沙门氏菌SifA蛋白的单克隆抗体，分析其亚类、腹水效价、亲和力和 反应性，并初步应用于检测沙门氏菌感染巨噬细胞后SifA分泌的生物学特性。试验通过构建重 组表达大肠杆菌 BL21（DE3）/pET-28a-sifA 和 BL21（DE3）/pGEX-6P-1-sifA，表达和纯化得到 rHis-SifA和rGST-SifA蛋白，以rHis-SifA作为免疫抗原，rGST-SifA作为检测抗原，采用B细胞 杂交瘤技术制备SifA单克隆抗体，并使用鼠源亚类鉴定试剂盒确定其亚类，间接ELISA方法测定 其腹水效价和亲和力，Western blot分析其反应性、与肠杆菌科其他细菌交叉反应的特异性和巨 噬细胞中沙门氏菌SifA的分泌特性，评价其效果或应用潜力。结果显示：成功制备10株单克隆 抗体，其中单克隆抗体10G6亚型为IgG1，其效价达1.0×106 以上，亲和常数为3.66×109 /M，能特异 性结合rHis-SifA和rGST-SifA蛋白，Western blot结果显示该单克隆抗体能特异性识别8种不同 血清型沙门氏菌，并能确定沙门氏菌感染巨噬细胞后SifA的分泌特性。研究表明，成功制备10株 单克隆抗体，其中单克隆抗体10G6具有良好的特性，为沙门氏菌的研究和检测提供生物材料。

关键词: 沙门氏菌；SifA蛋白；单克隆抗体；应用；分泌

中图分类号: 

• S855.1