摘要： 为建立一种快速、灵敏且特异的 H9N2 亚型禽流感病毒（AIV）的双重荧光定量 RT-PCR 检测方法，试验根据 H9N2 AIV 的 HA 基因和 NA 基因保守区域设计特异性引物及 TaqMan探针，通过优化反应体系及条件，建立H9N2亚型AIV的双重荧光定量RT-PCR检测方 法，进一步对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估，并将建立的方法用于临床样品的检 测，与H9亚型AIV荧光RT-PCR检测试剂盒进行比较。结果显示：该方法与其他亚型AIV、新 城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病病毒和传染性支气管炎病毒 无交叉反应，检测限为 0.1 copies/μL，批内和批间变异系数均小于 5%，临床样本检测阳性率 （24.3%）高于H9亚型AIV荧光RT-PCR检测试剂盒（18.9%）。研究表明，建立的H9N2 AIV双 重TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法特异性强，敏感性较高，能够应用于H9N2 AIV 的快速检测。

关键词: H9N2亚型禽流感病毒；TaqMan探针；荧光定量RT-PCR；HA基因；NA基因

中图分类号: 

• S852.5