中国家禽 ›› 2026, Vol. 48 ›› Issue (10): 118-126.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2026.10.014
李天阳1,张旭旭2,石雨贤2,赵丽坤1*,李玉荣2*
摘要: 为解决畜牧业禁抗限抗政策下鸡源大肠杆菌感染的防控难题,研究以分离自肉鸡养殖场粪水的大肠杆菌噬菌体为研究对象,采用双层平板法对其分离纯化,系统测定其生物学特性并开展全基因组分析,同时通过鸡胚模型评估其抗感染效果;采用双层平板法分离纯化噬菌体,测定其效价、最适感染复数(MOI)、宿主谱及紫外线、温度、pH值对其活性的影响;经全基因组测序分析其遗传特征及进化分类;通过回归分析法计算鸡源致病性大肠杆菌EC2-32对10胚龄鸡胚的半数致死浓度(LC50),并设置阴性对照、阳性对照、噬菌体预防组、噬菌体治疗组、噬菌体杀灭组,评价噬菌体的防控效果及对炎症因子的影响。结果显示:共分离出一株噬菌体,命名为EC-2-32-1,其效价为6.4×107 PFU/mL,最适MOI为10,可裂解12株测试大肠杆菌中的8株,对非大肠杆菌菌株无裂解活性;该噬菌体能耐受25~45 ℃及pH 3.0~12的酸碱环境,对紫外线敏感,30 W紫外照射30 min后效价降至3.1×105 PFU/mL;该噬菌体基因组为171?349 bp的环状双链DNA,GC含量为39.7%,注释得到277个编码基因,无溶源性及毒力、耐药相关基因,含宿主裂解必需基因,确认为Dhakavirus属烈性噬菌体。噬菌体预防组和噬菌体杀灭组鸡胚死亡率较阳性对照组分别降低25%和30%,且噬菌体杀灭组鸡胚尿囊液中白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α水平极显著低于阳性对照组(P<0.01);噬菌体单独接种组无鸡胚死亡,证实其无细胞毒性。研究表明,噬菌体EC-2-32-1生物学特性稳定,对鸡胚大肠杆菌感染具有良好的防控效果,可为畜牧业开发非抗生素抗菌制剂提供试验依据和候选菌株。
中图分类号: