摘要： 为满足基层实验室对K亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virus subgroup K，ALV-K） 检测需求，研究建立了一种基于重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条（Recombinase polymerase amplifcation- lateral flow dipstick，RPA-LFD）的 ALV-K 快速检测方法。试验首先通过细胞培 养分离鉴定出一株ALV-K，并以此分离株的前病毒DNA作为建立检测方法的模板；其次，针对 ALV-K gp85基因保守位置设计引物和探针，优化反应体系的引物浓度、探针浓度和反应温度，在 此基础上进行敏感性预试验并以预试验检测限优化反应时间；最后，以优化反应时间进行敏感性 试验、稳定性试验及特异性试验。结果显示：建立的ALV-K RPA-LFD反应体系在引物浓度为 0.45 mmol/L，探针浓度为0.14 mmol/L，39 ℃条件下反应21 min，其检测限为4.86×102 copies/反应 的ALV-K DNA，并且不与其他常见禽类病原体核酸发生非特异扩增反应；30份临床病料中有 14份ALV-K阳性，与单重PCR方法结果一致。研究表明，建立的ALV-K RPA-LFD检测方法具 有快速、特异、操作简单，不需要复杂仪器，能够直观地观察结果的优点，适用于临床快速检测 ALV-K，特别是实验室条件有限的检测场景。

关键词: 家禽；K亚群禽白血病病毒；重组酶聚合酶等温扩增-侧流层析试纸条；快速检测

中图分类号: 

• S855.3