摘要： 为构建H7N9亚型禽流感病毒和血清4型禽腺病毒（FAdV-4）的二联疫苗候选株， 试验通过 CRISPR/Cas9 和 Cre-Loxp 系统，以课题组前期构建的表达 EGFP 蛋白的重组病毒 FAdV4-EGFP为载体，构建能够稳定表达H7N9亚型禽流感病毒血凝素（HA）蛋白的重组血清 4型腺病毒；并通过PCR、间接免疫荧光试验（IFA）、Western blot试验以及SPF鸡保护性试验等方 法，探究此重组病毒体外生物学特性并评估其为鸡提供的保护力。结果显示：研究成功构建能 稳定表达H7N9禽流感亚型病毒HA蛋白的重组血清4型腺病毒，命名为FAdV4-H7；FAdV4-H7 能在LMH细胞高效复制，并能在LMH细胞传代15次后仍能稳定表达HA蛋白；FAdV4-H7不仅 高度致弱，而且能诱导机体产生高滴度针对H7N9亚型禽流感病毒HI抗体和FAdV-4的中和抗 体，能为SPF鸡提供足够保护来抵抗致死性FAdV-4感染。研究表明，试验成功构建了重组病毒 FAdV4-H7，为H7N9亚型禽流感病毒和FAdV-4的联防联控提供了二联苗候选疫苗株。

关键词: H7N9亚型禽流感病毒；HA蛋白；重组血清4型腺病毒；CRISPR/Cas9；疫苗

中图分类号: 

• S855.3