中国家禽 ›› 2025, Vol. 47 ›› Issue (10): 60-68.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2025.10.009

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高亲和力鸡γ-干扰素兔源单克隆 配对抗体的制备及鉴定

陈天祥1,2,3,张庆如1,2,3,张念之3*,孙怡朋1,2,3*   

  1. (1.国家兽医公共卫生安全重点实验室,北京 100193; 2.农业农村部禽流感等重大家禽疫病防控重点实验室,北京 100193; 3.中国农业大学动物医学院,北京 100193)
  • 出版日期:2025-10-15 发布日期:2025-09-22
  • 作者简介:陈天祥(1995-),男,博士研究生,研究方向为动物传染病诊断与防治技术,E-mail:b20213050427@cau.edu.cn

  • Online:2025-10-15 Published:2025-09-22

摘要: 为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ) 兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的 chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单 B细胞分 选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的亲和力及配对性 能进行系统评估。结果显示:共获得3株单克隆抗体(38-9、56-3和68-7),解离常数(KD)值均 达10-12 mol/L,显示出极高的亲和力;56-3与38-9和68-7之间无竞争关系,而38-9与68-7之间 存在明显竞争,由此可构建 56-3/38-9和 56-3/68-7两对稳定的配对抗体。研究表明,试验获 得的3株单克隆抗体具备高亲和力和良好的配对特性,适用于chIFN-γ的高灵敏免疫检测,为 禽类细胞免疫应答监测及chIFN-γ免疫功能研究提供了关键工具。

关键词: 鸡γ-干扰素;兔源单克隆抗体;流式细胞分选技术;生物膜干涉技术;配对抗体

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