中国家禽 ›› 2025, Vol. 47 ›› Issue (10): 60-68.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2025.10.009
陈天祥1,2,3,张庆如1,2,3,张念之3*,孙怡朋1,2,3*
摘要: 为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ) 兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的 chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单 B细胞分 选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的亲和力及配对性 能进行系统评估。结果显示:共获得3株单克隆抗体(38-9、56-3和68-7),解离常数(KD)值均 达10-12 mol/L,显示出极高的亲和力;56-3与38-9和68-7之间无竞争关系,而38-9与68-7之间 存在明显竞争,由此可构建 56-3/38-9和 56-3/68-7两对稳定的配对抗体。研究表明,试验获 得的3株单克隆抗体具备高亲和力和良好的配对特性,适用于chIFN-γ的高灵敏免疫检测,为 禽类细胞免疫应答监测及chIFN-γ免疫功能研究提供了关键工具。
中图分类号: