中国家禽 ›› 2020, Vol. 42 ›› Issue (11): 17-21.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2020.11.003
潘晓丽,蓝立明,江林,何文峰,陈悦,张迎燕,吴旭,李昂*
摘要: 试验旨在建立番鸭等级前卵泡颗粒细胞的体外培养模型,为研究番鸭的就巢性 和提高产蛋性能提供试验基础。在体外分离培养番鸭小黄卵泡颗粒细胞,探究不同的消化酶 (12.5 g/mL Ⅱ型胶原酶、0.1% Ⅱ型胶原酶和0.25%胰蛋白酶)、消化时间(3 min、5 min、 8 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min和40 min)和血清浓度(含0.5%、1%、2.5%、5%和 10% FBS的M199完全培养液)对颗粒细胞增殖的影响,筛选最佳消化体系和培养体系。结果 显示:用0.1%的Ⅱ型胶原酶在37 ℃、5% CO2培养箱中消化8~10 min可获得较优的颗粒细胞; 对于刚分离到的颗粒细胞用含0.5% FBS的M199完全培养液先培养24 h后换成无血清的培养 液培养,既能维持增殖活性和细胞形态,又能满足后续试验的需要。
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