摘要： 为研制禽网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）囊膜蛋白 gp90单克隆抗体，试验构建重组原核表达质粒pCold-gp90，转化至感受态细胞BL21中进行蛋 白诱导表达；采用纯化的 gp90蛋白免疫 BALB/c小鼠，通过细胞融合技术制备杂交瘤细胞，利 用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式细胞分选技术筛选鉴定阳性杂交瘤细胞，并制备单 克隆抗体腹水，对单克隆抗体的亚型、效价进行测定；并初步测试单克隆抗体在Western blot和 间接免疫荧光试验（IFA）中检测 gp90 蛋白和 REV 中的应用效果。结果显示：REV 囊膜蛋白 gp90获得成功表达和纯化，获得 3株能稳定分泌 REV gp90单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株， 该单克隆抗体亚型均为 IgG1、Kappa，腹水效价均可达 1∶64 000；该单克隆抗体不仅可用于 Western blot或IFA检测 gp90原核表达蛋白和真核表达蛋白，还可用于IFA检测REV的TCID50 效价。研究表明，成功制备的 REV gp90单克隆抗体为进一步的 REV检测方法建立和 gp90蛋 白功能研究提供了重要工具。

关键词: 禽网状内皮组织增生症病毒；囊膜蛋白gp90；原核表达；杂交瘤细胞；单克隆抗体

中图分类号: 

• S855.3