中国家禽 ›› 2025, Vol. 47 ›› Issue (6): 162-168.doi: 10.16372/j.issn.1004-6364.2025.06.020

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鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立 及初步应用

周鲁阳1,2,3,陈学圣1,2,3,宋法慧1,2,3,吴际坤1,2,3,俞长旭1,2,3,王傲菲1,2,3,魏书琦1,2,3,杨 硕1,2,3,汪建华4,张瑞华1,2,3,姜世金1,2,3,朱岩丽1,2,3*   

  1. (1.山东农业大学动物医学院,山东省动物疫病预防控制工程技术研究中心,山东泰安 271017; 2.山东农业大学动物医学院,山东省动物生物技术与疫病防控重点实验室,山东泰安 271017; 3.山东农业大学动物医学院,山东省人畜共患病重点实验室,山东泰安 271017; 4.山东和康源生物育种股份有限公司,山东新泰 271299)
  • 出版日期:2025-06-15 发布日期:2025-06-06
  • 作者简介:周鲁阳(1999-),男,硕士研究生,研究方向为动物疫病防控,E-mail:zluyang0112@163.com

  • Online:2025-06-15 Published:2025-06-06

摘要: 为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法, 试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物, 通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式 PCR 检测方法,并应用该方法检 测鸭的临床样品。结果显示,建立的检测方法与其他病原体无交叉反应,特异性良好,MG DNA模板检测限为5×10-6 ng/μL,其敏感性是常规PCR的1 000倍以上,且批内和批间试验重复 性良好;利用该方法对临床病死鸭胚与咽、肛拭子混合样本的检出率分别为10%(5/50)和33% (21/63)。研究表明,建立的MG套式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高等优点,适用于鸭 群中MG早期感染的检测,为MG的检测和防控及分子流行病学调查提供有力的检测手段。

关键词: 鸭;鸡毒支原体;套式PCR;mgc2

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